Finalizadas las vacaciones
navideñas retomamos el trabajo de laboratorio. Perdimos algunas de las cepas,
pero afortunadamente, habíamos preparado réplicas y sobrevivieron un número
suficiente como para iniciar cultivos y poder hacer el seguimiento del crecimiento
poblacional.
Los estudiantes, por parejas, han
arrancado los cultivos y se responsabilizarán de hacer el seguimiento durante
todo el proceso. Se han iniciado seis líneas de cultivo, cada una de las cuales
se ha arrancado usando 1 mL de cepa madre como inóculo, al que se le añadieron
9 mL de medio de cultivo. El medio de cultivo lo preparamos previamente usando
agua destilada esterilizada y un fertilizante para plantas líquido (fórmula:
NPK 7 + 3+ 6 más micronutrientes. Compo). La concentración final de medio de
cultivo fue de 3 mL/1L de agua destilada-esterilizada.
Una vez establecida una línea de
cultivo cada pareja realizó un conteo inicial de células, proceso que se
repetirá periódicamente hasta comprobar que las algas entran en una fase de crecimiento
exponencial, momento en el que serán transferidas a un volumen mayor (100 mL).
Iremos elevando el volumen hasta lograr un volumen final de 5L, capacidad máxima
de producción de nuestra pequeña instalación. Es decir, llevaremos a cabo un
cultivo por lotes.
El conteo celular lo hemos hecho a
10 aumentos, utilizando una cámara de Neubauer mejorada y siguiendo el
protocolo habitual en este tipo de dispositivos.
Los primeros resultados
obtenidos en las 6 líneas indican que las poblaciones de algas están en una
fase lag o fase de inducción, en el que la densidad de algas (células por mL)
no ha aumentado (en algunas líneas ha disminuido). Este resultado coincide con
lo reportado en bibliografía, donde se describe este comportamiento y se
atribuye a la necesidad de una adaptación fisiológica del metabolismo celular
al crecimiento. Las algas necesitan un tiempo para adaptar a las nuevas condiciones de cultivo la maquinaria
enzimática implicada en la división celular y la fijación de carbono.
En las siguientes semanas se han
realizado dos recuentos más y en todas las líneas la densidad celular aumentó,
esperamos que el recuento de la próxima semana indique que entramos en una fase
de crecimiento exponencial.
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